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植物细胞培养基较微生物培养基复杂得多

作者:恒昌机械 时间:2019/9/8 22:03:21 浏览:93次

植物细胞培养基


植物细胞培养基较微生物培养基复杂得多,且工业化培养基又不同于实验室用培养基,即便是工业化培养本身,甚至因培养目的及培养阶段不同而采用不同培养基。Moris对长春花细胞悬浮培养的培养基进行了组合研究,并考察其蛇根碱、阿玛碱及其他生物碱产量的变化,发现在细胞生长阶段和产物生产阶段采用不同的培养基,各种产物均有不同程度地增加,说明不同培养阶段必须采用不同培养基。

但无论培养目标是细胞生长还是代谢产物的积累,培养基均由碳源、有机氮源、无机盐、植物生长激素、有机酸和些复合物质组成。

(1)碳源

蔗糖或葡萄糖是常用的碳源,果糖的应用比前两者少。其他的碳水化合物不适合作为单的碳源。通常,增加培养基中蔗糖的含量可增加培养细胞的次代谢产物量。

(2)有机氨源

通常采用的有机氮源有蛋白质水解物(包括酪蛋白水解物)、谷氨酰胺或氨基酸混合物。有机氮源对细胞的初培养的早期生长阶段有利。L谷氨酰胺可代替或补充某种蛋白质水解物。

(3)无机盐

对于不同的培养形式,无机盐的佳浓度是不相同的。通常在培养基中无机盐的浓度应在25mmol-L-1左右。硝酸盐浓度般采用25~40mmolL-1,虽然硝酸盐可以单成为无机氮源,但是加入铵盐对细胞生长有利,如果添加些琥珀酸或其他有机酸,铵盐也能单成为氮源。

(4)植物生长激素

大多数植物细胞培养基中都含有天然的和合成的植物生长激素。

激素分成两类,即生长素和分裂素。生长素在植物细胞和组织培养中可促进根的形成,有效和常用的有嗓丁酸(IBA)、哚乙酸和奈乙酸。分裂素通常是腺嘌呤衍生物,使用多的是6苄氨基嘌呤(BA)和玉米素(Z)。分裂素和生长素通常起使用,促使细胞分裂、生长,使用量为0.1~10mg-L-1,根据不同细胞株而异。

(5)有机酸

加入丙酮酸或者三羧酸循环中间产物(如柠檬酸、琥珀酸、苹果酸),能够保证植物细胞在以铵盐作为单氮源的培养基上生长,并且耐受钾盐的能力提高。三羧酸循环中间产物,同样能促使低接种量的细胞和原生质体的生长。

(6)复合物质

复合物质通常作为细胞的生长调节剂,如酵母抽提液、麦芽抽提液、椰子汁和水果汁。目前,这些物质大多已被已知成分的营养物质所替代,仅椰子汁仍在广泛使用,使用浓度是1~15mmol-L-1。在许多例子中还发现,有些抽提液对细胞有毒性。



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